| |
Апрель 2021 г.
Наносуспензии серебра
Методы испытаний: проблема определения биоцидной активности
Внедрение технологий в производство, а также производство новой продукции осуществляется на основе технической документации, содержащей
требования к продукции, в том числе требования к показателям назначения, а также методы испытания продукции на соответствие
установленным требованиям. Для наносуспензий серебра, предназначенных оказывать подавляющее воздействие на микроорганизмы, показателем
назначения является минимальная подавляющая концентрация наносуспензии (наиболее низкая концентрация наносуспензии, которая при
определенных условиях in vitro предотвращает появление видимого роста исследуемого микроорганизма в бульонной культуре или на
плотной среде в пределах определенного промежутка времени). Однако в стандартах, устанавливающих требования к наносуспензиям серебра
(в международном ISO/TS 20660:2019, межгосударственном ГОСТ 34683–2020 и российском ГОСТ Р 59582–2021), среди характеристик наносуспензий
серебра,
регламентированных этими стандартами, нет показателя «минимальная подавляющая концентрация», а также в этих стандартах не
приводится метод определения этого показателя. Как же тогда действие этих стандартов может распространяться (как в них указано)
на антибактериальные коллоидные растворы наночастиц серебра (наносуспензии серебра), если они не регламентируют основной показатель,
определяющий антибактериальную активность наносуспензий серебра?
Микробиологические лаборатории, когда к ним обращаются с просьбой определить минимальную подавляющую концентрацию (МПК) наносуспензий серебра,
выполняют определение МПК, используя методы определения чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам, прописанные в
указанных ниже клинических рекомендациях, так как нет стандартизированных методов определения МПК наносуспензий серебра.
До недавнего времени определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам осуществлялось, пользуясь документом
«Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам. Методические указания МУК 4.2.1890–04» (Клиническая
микробиология и антимикробная химиотерапия. 2004 — Т. 6, № 4.
— С. 306–359), который базируется на требованиях американского
стандарта "M100 CLSI" Института клинических и лабораторных стандартов (Clinical and Laboratory Standards Institute). На
сегодняшний день наиболее теоретически обоснованными считаются методы, основанные на комплексе подходов, предлагаемых Европейским
комитетом по определению чувствительности к антимикробным препаратам (European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing
— EUCAST). В 2014 году Межрегиональной ассоциацией поликлинической микробиологии и антимикробной химиотерапии России были введены в
действие новые методические рекомендации «Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам. Клинические
рекомендации» (Смоленск: Межрегиональная ассоциация поликлинической микробиологии и антимикробной химиотерапии, 2014.
— 154 с.),
основанные на комплексе подходов, разработанных EUCAST.
Эти рекомендации постоянно дорабатываются по мере накопления
новых данных. Тем не менее, устаревшие методические указания МУК 4.12.1890–04 не утратили юридическую силу, и их продолжают применять;
в частности применяются различные питательные среды, тогда как в указанных выше новых рекомендациях предписано
применять
питательную среду Мюллера-Хинтона. Ситуация, при которой оба эти документа являются действующими, позволяет обращаться на рынке нескольким
питательным средам. При этом на рынке присутствуют и не стандартные питательные среды. Поэтому возникает проблема достоверности результатов
тестирования, связанная с различием свойств используемых питательных сред, а также с качеством этих сред от разных производителей.
Надо иметь в виду, что указанные выше документы разработаны для антибактериальных препаратов, применяемых в медицине, и их
пригодность для испытаний наносуспензий серебра не очевидна. Например, методические указания МУК 4.2.1890–04 предусматривают на
стадии приготовления инокулята применять физиологический раствор (0,9 % водный раствор NaCl). В указанных выше клинических рекомендациях
2014 года для приготовления инокулята предписано применение изотонического раствора, т.е. не ставится ограничение на вид изотонического
раствора, но обычно микробиологические лаборатории применяют простейший изотонический раствор
— 0,9 % водный раствор NaCl. Кроме
этого, многие питательные среды в своем составе содержат NaCl. Однако наносуспензии серебра становятся нестабильными в присутствии NaCl.
Количество наночастиц уменьшается за счет образования хлористого серебра. Этот процесс может быть длительным или происходить очень быстро,
в зависимости от того, каким способом получены наносуспензии
серебра
(пример).
Следовательно, стандартные методы определения МПК, применяемые микробиологическими лабораториями в соответствии с указанными выше
документами, могут дать недостоверные данные. Заметим, что в составе питательной среды Мюллера-Хинтона нет NaCl, но его могут применять,
например, при приготовлении маточного раствора микроорганизмов
(при смывании микробных клеток с агара в пробирки) или при приготовлении разведений
микробных клеток (при разбавлении маточного раствора до требуемых концентраций микроорганизмов).
Таким образом, получение достоверных данных о биоцидной активности наносуспензий серебра является проблемой, требующей решения. Необходим
стандартизированный метод определения МПК наносуспензий серебра, разработанный с учетом их специфики. А для внедрения технологий получения
наносуспензий серебра с биоцидными свойствами в производство, а также для их производства и сертификации необходимы полноценные стандарты,
регламентирующие наряду с другими требованиями также требования к их биоцидной активности.
Ш. М. Шарипов (ООО «ProventaTech»)
_____________________________________________________________
Примечание (октябрь 2022 г.)
В январе 2022 года Центр развития нанотехнологий при Национальном университете
Узбекистана принял для выполнения совместно с НИИ эпидемиологии, микробиологии и инфекционных заболеваний при Министерстве здравоохранения
Республики Узбекистан комплексную программу «Разработка и введение в систему государственных стандартов стандарта на метод определения
чувствительности микроорганизмов к наносуспензиям серебра и формирование программы по созданию инновационной продукции на основе наносуспензий
серебра с биоцидными свойствами». Заявки по проектам научно-исследовательских работ, выполнение которых предусматривалось этой программой,
были поданы в Министерство инновационного развития Республики Узбекистан. Однако выполнение этой комплексной программы не было
поддержано указанным министерством. (По этому вопросу смотрите также «Актуальные темы. Что мы покупаем под названием “коллоидное
серебро”?» на данном сайте.)
|
|
